Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在 20~40kDa,通常由()亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA,极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA,或 DNA/RNA 杂合链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,Ⅱ类酶既具有()专一性,也具有()的专一性,一般在识别序列内切割。切割的方式有(),产生()末端的DNA片段或()的DNA片段。作用时需要()作辅助因子,但不需要()和()。
限制性内切核酸酶 PstI切割质粒 pBR322后,再用外切核酸酶 ExoⅢ进行系列缺失,可得到一系列大小不同的缺失突变体。
用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后,可用 E.coli DNA连接酶进行连接。
双酶消化法(doubledigests)绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。
Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别()个碱基,也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析,限制性内切核酸酶识别序列具有()倾向,即它们在识别序列中含量较高。 8.EcoK是 I类限制性内切核酸酶,分子组成是α2 β2 γ,分子量 300kDa。在这些亚基中,o 亚基具有()作用;β亚基具有() 的活性;γ亚基的作用则是()。
通过比较不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的限制酶切()
在下列限制性内切核酸酶中,()的识别序列中有松弛碱基,选用这种酶时要考虑连接后外源DNA的插人方向。
限制性内切核酸酶(限制酶)能在DNA分子的一定部位上切割,它不仅对切点附近的两个碱基有识别能力,而且对较远的碱基顺序也能识别,它一般能识别碱基的个数为()。
有人用限制性内切核酸酶 EcoRl 分别切割松弛型质粒 ColEl 和严紧型质粒 pSCl01(各有一个切点),然后重组连接形成一个杂种质粒 pSCl34,请推测这种质粒有什么特性和用途。
通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的()。